磷檢測(cè)試劑盒(硫酸亞鐵鉬藍(lán)微板法)產(chǎn)品簡(jiǎn)介

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
血清中的無(wú)機(jī)磷(Inorganic phosphorous)主要由H2PO4-和HPO42-兩種磷酸根陰離子組成，上述陰離子在在丌同的 pH 環(huán)境下能快速相互轉(zhuǎn)換。在 pH7.4 血清中，二者濃度比例為 1:4；在酸中毒環(huán)境下二者濃度約為 1:1；在堿中毒環(huán)境下二者濃度比例為 1:9；在 pH4.5尿液中濃度比例為100:1。WHO 推薦的常規(guī)檢測(cè)方法為比色法，我國(guó)衛(wèi)生部臨檢中心推薦的常規(guī)方法為硫酸亞鐵鉬藍(lán)比色法和米吐爾鉬藍(lán)比色法。 

無(wú)機(jī)磷檢測(cè)試劑盒(硫酸亞鐵鉬藍(lán)微板法)是先經(jīng)硫酸亞鐵提純蛋白，利用無(wú)機(jī)
磷不鉬酸銨結(jié)合生成磷鉬酸銨，后者被硫酸亞鐵還原成藍(lán)紫色的復(fù)合物，通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)
640nm 處吸光度值，根據(jù)公式計(jì)算出無(wú)機(jī)磷含量。本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，丌宜用于臨
床診斷戒其他用途。

操作步驟(僅供參考)：
1、(選做)制備樣品：
①血漿、血清樣品：取 0.02ml 待測(cè)血漿、血清樣品，加入 0.48ml Pi Assay buffer，
充分混勻，室溫靜置 10min，3000g 離心 10min，取上清，-20℃凍存，用于 Pi
的檢測(cè)。

②尿液樣品：取適量的待測(cè)尿液，用 50%的鹽酸調(diào) pH 至 6.0。用蒸餾水做 1:10-1:20
稀釋。取 0.02ml 稀釋后的尿液樣品，加入 0.48ml Pi Assay buffer，充分混勻，室
溫靜置 10min 3000g 離心 10min，取上清， 20℃凍存，用于 Pi 的檢測(cè)。
 
試劑名稱：
試劑(A): 磷標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml) 1ml 4℃
試劑(B): 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 10ml 4℃ 避光
試劑(C): Pi Assay buffer 80ml 4℃ 避光
試劑(D): 硫酸亞鐵鉬藍(lán)顯色液 3ml 4℃ 避光
 

磷檢測(cè)試劑盒(硫酸亞鐵鉬藍(lán)微板法)產(chǎn)品簡(jiǎn)介

③細(xì)胞戒組織樣品：取恰當(dāng)細(xì)胞戒組織進(jìn)行勻漿，低速離心取上清。取 0.02ml 勻漿
樣品，加入 0.48ml Pi Assay buffer，充分混勻，室溫靜置 10min，3000g 離心
10min，取上清，-20℃凍存，用于 Pi 的檢測(cè)。

④高濃度樣品：如果樣品中含有較高濃度的 Pi，可以使用去離子水稀釋。

⑤(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用 BCA 蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度，以便于后續(xù)
計(jì)算單位蛋白重量組織戒細(xì)胞內(nèi)的 Pi 含量。

2、制備磷標(biāo)準(zhǔn)工作液：取適量的磷標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)，按磷標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)：標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
=1:24 的比例稀釋，即獲得磷標(biāo)準(zhǔn)(1.292mmol/L)。取 0.02ml 磷標(biāo)準(zhǔn)(1.292mmol/L)，
加入 0.48ml Pi Assay buffer，充分混勻，室溫靜置 10min，3000g 離心 10min，取
上清，即為磷酸標(biāo)準(zhǔn)工作液，-20℃凍存，用于 Pi 的檢測(cè)。
3、Pi 檢測(cè)：按下表操作。
4、混勻，室溫靜置 15min，酶標(biāo)儀 640nm 處檢測(cè)，以空白管調(diào)零，讀取各管吸光度值。

注意事項(xiàng)：
1、 溶血樣本對(duì)檢測(cè)有干擾，盡量避免采用溶血樣本。
2、 本法能夠用于自動(dòng)生化分析儀終點(diǎn)檢測(cè)法。

磷檢測(cè)試劑盒(硫酸亞鐵鉬藍(lán)微板法)產(chǎn)品簡(jiǎn)介