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阿利新藍(lán)-茜素紅胎鼠染色實(shí)驗(yàn)檢測(cè)服務(wù)介紹

更新時(shí)間:2025-09-22      瀏覽次數(shù):217

阿利新藍(lán)-茜素紅胎鼠染色實(shí)驗(yàn)檢測(cè)服務(wù)介紹

服務(wù)介紹:

阿利新藍(lán)-茜素紅染色(Alcian Blue-Alizarin Red Staining)是一種常用于胚胎或胎鼠骨骼發(fā)育研究的組織化學(xué)染色方法。該技術(shù)可以同時(shí)染色軟骨和骨組織,使軟骨呈現(xiàn)藍(lán)色,骨組織呈現(xiàn)紅色,從而清晰地區(qū)分兩者,便于觀察骨骼發(fā)育的形態(tài)和過(guò)程。

染色原理:

1、阿利新藍(lán)(Alcian Blue):

阿利新藍(lán)是一種陽(yáng)離子染料,能夠與酸性多糖(如軟骨中的硫酸軟骨素和透明質(zhì)酸)結(jié)合,使軟骨組織呈現(xiàn)藍(lán)色。

2、茜素紅(Alizarin Red):

茜素紅是一種陰離子染料,能夠與鈣離子結(jié)合,使鈣化的骨組織呈現(xiàn)紅色。 

實(shí)驗(yàn)步驟

1. 樣本準(zhǔn)備

取胎鼠(通常為胚胎期或新生鼠),去除皮膚和內(nèi)臟,保留骨骼。用固定液(如95%乙醇或4%多聚甲醛)固定樣本,通常固定24-48小時(shí)。

2. 染色

阿利新藍(lán)染色:將樣本放入阿利新藍(lán)染液中(通常為0.1%阿利新藍(lán)溶于酸性乙醇或醋酸緩沖液),染色6-24小時(shí)。染色后,用酸性乙醇(如1%鹽酸乙醇)脫色,直至軟骨呈現(xiàn)清晰的藍(lán)色。

茜素紅染色:將樣本放入茜素紅染液中(通常為0.1%茜素紅溶于蒸餾水或堿性溶液),染色2-4小時(shí)。染色后,用蒸餾水洗滌樣本,去除多余染料。

3. 透明化處理

將樣本依次放入梯度乙醇(如70%、95%、100%)中脫水。

使用透明劑(如甘油、苯甲醇或苯甲酸芐酯)透明化樣本,使骨骼結(jié)構(gòu)更清晰可見(jiàn)。

4. 觀察與保存

將樣本置于透明溶液中(如甘油或苯甲醇),在顯微鏡下觀察。可拍照記錄染色結(jié)果,樣本可長(zhǎng)期保存于透明溶液中。

注意事項(xiàng):

1、染色時(shí)間:染色時(shí)間需根據(jù)樣本大小和發(fā)育階段調(diào)整,避免染色過(guò)深或過(guò)淺。

2、脫色處理:阿利新藍(lán)染色后需充分脫色,以免影響茜素紅染色效果。

3、透明化:透明化處理需逐步進(jìn)行,避免樣本變形或損壞。

4、樣本選擇:胎鼠的發(fā)育階段需根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇,通常選擇骨骼發(fā)育關(guān)鍵期


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